A Laboratory
Guide to the Tight Junction
研究紧密连接的实验室指南
作者：Jianghui Hou
出版：Academic Press
索书号：Q2H835/2020/ Y
ISBN: 978-0-12-818647-3
藏书地点:武大外教中心
后生动物的生命基于组织的形成和组织特异性功能。组织建立在基本的细胞结构上——一个将生物体内部与外部环境分隔开的多细胞层。随着生物体发展出更精细的组织结构，对细胞间相互作用的需求增加，提出了许多导致形成特化细胞连接的结构和功能挑战。这些连接不仅将细胞粘合在一起（粘附连接和桥粒），而且还进行细胞间通讯（间隙连接）并提供屏障来调节溶质和水通过细胞间隙的流动（紧密连接）。本节介绍细胞连接的四种主要形式的概念，并描述它们的功能、组成、相互作用、信号。
紧密连接是由 400 多种蛋白质组成的高阶膜结构。这些蛋白质相互作用形成紧密连接生物化学的基础。本节描述了用于研究紧密连接内蛋白质相互作用的关键方法，重点是密蛋白相互作用，其中包括通过亚细胞分级分离紧密连接的增溶和分离、顺式和反式密蛋白相互作用的免疫沉淀、化学交联密蛋白寡聚体、密蛋白相互作用的酵母双杂交筛选和重组密蛋白生产。
紧密连接创建了一个细胞旁通路，允许离子和溶质根据大小和电荷渗透。紧密连接通透性的研究涉及离子、溶质和水的通量率以及跨上皮电阻和跨上皮电位的测量。本章介绍了用于测量各种细胞和组织模型中紧密连接渗透率的关键方法，其中包括细胞培养物的电生理记录、上皮组织、上皮欧姆计测量、阻抗记录、通量测定的水渗透性测量室。
可以通过光和电子显微镜技术研究紧密结。固定对于保持细胞和组织中紧密连接的结构和功能至关重要。本节介绍用于固定器官中紧密连接的关键方法。几乎在每个器官中都发现了紧密连接，无论是上皮来源还是非上皮来源。本节还提供了器官中紧密连接定位的综合图谱，为紧密连接研究奠定了组织学前提。
紧密连接是位于上皮或内皮细胞顶端表面附近的亚细胞器。紧密连接可以通过针对作为细胞器组成部分的蛋白质的抗体进行修饰。本节介绍了用于通过光学显微镜观察紧密连接的关键方法，包括用于非偏振细胞的宽视野荧光显微镜、用于薄组织切片的广视野荧光显微镜、用于偏振细胞的共聚焦显微镜和用于厚组织切片的共聚焦显微镜。
紧密连接首先被描述为通过使用电子显微镜技术在上皮细胞和内皮细胞顶点附近的膜融合。电子显微镜极大地有助于阐明细胞和组织中的紧密连接结构和功能。本章介绍了用于通过电子显微镜观察紧密连接的关键方法，包括用于细胞培养的透射电子显微镜、用于组织切片的透射电子显微镜、用于示踪剂测定的透射电子显微镜、用于免疫标记应用的透射电子显微镜、冷冻断裂电子显微镜和冷冻断裂复制免疫标记技术。
紧密连接由培养中的上皮细胞或内皮细胞形成。培养的细胞模型允许以可控方式添加、去除或突变紧密连接蛋白。本章介绍了用于操作细胞培养中紧密连接蛋白的关键方法，包括上皮细胞培养的通用方案、钙开关测定、逆转录病毒介导的紧密连接蛋白转基因表达，以及逆转录病毒介导的 RNA 干扰以沉默紧密连接蛋白。
紧密连接在器官系统中发挥多种生理作用。转基因小鼠模型允许在靶器官中添加、移除或突变紧密连接基因，以解决功能获得或功能丧失的影响。本章描述了用于操纵小鼠胚胎和 ES 细胞中紧密连接基因的关键方法，作为产生转基因突变小鼠的前提，包括转基因、DNA 注射转基因过表达、慢病毒介导的基因敲除和条件基因三种主要途径。
《紧密连接的实验室指南》一书于2020年由Academic
Press出版，作者是Jianghui Hou。
《紧密连接的实验室指南》一书中，研究人员介绍了紧密连接的实验室指南的技术和方法，重点是最近的技术发展，讨论的主题主要包括九个部分，包括紧密连接的生化方法；紧密连接的生物物理方法；紧密连接的组织学方法；用于紧密连接的光学显微镜；用于紧密连接的电子显微镜；紧密连接生物学的细胞模型；紧密连接生理学的小鼠模型。《紧密连接的实验室指南》一书从各个方面讲解了紧密连接的实验室指南的基础内容和研究方法，旨在为想要进一步研究紧密连接的实验室指南的研究人员提供简明易懂的介绍以及方法技术指导。
《紧密连接的实验室指南》一书作为细胞学的专业研究读物，观点新颖独到，内容饱满详实、语言浅显易懂，除此之外，还包括一些其他的特点：
1、本书分为九个章节，既讲解了紧密连接的实验室指南过程的基础知识，还讲解了深入研究紧密连接的实验室指南，是一本应用性很强的书籍，对于想要学习如果研究紧密连接的实验室指南的研究人员来说是一本很有意义的指导书籍。
2、每个章节都是由相关领域的专业人士所撰写，因此，本书讲解既详细又专业，作者能够从中了解到紧密连接的实验室指南相关的专业知识以及最新的前沿进展。
总的说来，《紧密连接的实验室指南》一书为想要了解紧密连接的实验室指南研究方法的人员提供了清晰的导读路径，作为紧密连接的实验室指南领域的一本前沿研究图书，是一本值得为想要涉足该领域的人员推荐的专业书籍。
本书目录：
第 1 章-介绍
第 2 章-紧密连接的生化方法
第 3 章-紧密连接的生物物理方法
第 4 章-紧密连接的组织学方法
第 5 章-用于紧密连接的光学显微镜
第 6 章-用于紧密连接的电子显微镜
第 7 章-紧密连接生物学的细胞模型
第 8 章-紧密连接生理学的小鼠模型
第 9 章-视角
林岚 武汉大学生命科学学院 博士研究生